手性柱通過(guò)手性固定相與手性化合物分子之間的相互作用實(shí)現(xiàn)手性識(shí)別。這種相互作用包括氫鍵、偶極-偶極作用、π-π作用、靜電作用、疏水作用或空間作用等多種類(lèi)型。這些作用力雖然微弱,但通過(guò)影響包埋復(fù)合物的形成和特殊位點(diǎn)與分析物的鍵合,共同作用于手性分離效果。
手性柱的使用注意事項(xiàng):
流動(dòng)相的選擇:流動(dòng)相中不能含有無(wú)機(jī)酸、無(wú)機(jī)堿,也不能使用不含銅離子的鹽,以防止損壞設(shè)備。同時(shí),流動(dòng)相必須采用預(yù)混合方式走等度,避免在線混合方式。
pH值的控制:手性柱的使用應(yīng)避免在pH低于4.0或高于7.0的條件下進(jìn)行,最佳pH范圍為4.0~7.0。強(qiáng)堿性溶液的導(dǎo)入尤其容易導(dǎo)致手性柱不可逆損壞。
流速與柱壓:流速一般不大于0.8ml/min,柱壓應(yīng)控制在50bar~100bar之間,以防超過(guò)色譜柱使用壓力上限。
柱的預(yù)處理與保養(yǎng):新柱使用前需用合適的溶劑沖洗流路,并在使用過(guò)程中注意定期沖洗和保養(yǎng),以延長(zhǎng)柱的使用壽命。
樣品的溶解:樣品必須用水或流動(dòng)相溶解,避免使用可能破壞手性固定相的溶劑。